DOI: 10.24411/1728-323X-2018-12065

Раздел

Экология

Название

УСОВЕРШЕНСТВОВАННЫЙ МЕТОД ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ БЕЛКОВ МОЛЛЮСКОВ ПРИ ЭЛЕКТРОФОРЕЗЕ В ДЕНАТУРИРУЮЩИХ УСЛОВИЯХ

Авторы

Т. С. Дроганова, старший преподаватель,

Л. В. Поликарпова, научный сотрудник,

А.        С. Коничев, старший научный сотрудник, Московский государственный областной университет, Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript.

Аннотация

Усовершенствован метод фракционирования белков пресноводных моллюсков, основанный на электрофоретическом разделении в денатурирующих условиях. Для повышения точности и эффективности исследования предлагается увеличить время и температуру денатурации белков, а также проводить электрофорез белков при постоянном охлаждении; при фракционировании использовать концентрирующий и сепарирующий гели; фиксацию проводить совместно с окрашиванием с использованием 3,5 %-ного раствора формальдегида в 25 %-ном этаноле. Данный метод применен для установления субъединичной структуры белков пресноводного моллюска живородка речная и определения молекулярной массы субъединиц. Метод может быть весьма информативным для решения задач экологической биохимии гидробионтов и в том числе моллюсков, как наиболее подходящих объектов для изучения механизмов биохимической адаптации к токсическому воздействию, обнаружения специфических белков-металлотионеинов, ответственных за связывание тяжелых металлов, белков теплового шока и других.

Ключевые
слова

фракционирование белков, электрофорез в денатурирующих условиях, пресноводные моллюски, живородка речная.

Библиографический список

1. Лелевич, В. В. Биологическая химия: методические рекомендации для студентов лечебного факультета / В. В. Ле-левич, И. О. Леднева, Н. Э. Петушок. — Гродно: ГрГМУ, 2016. — 73 с.

2. Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот Пособие для студентов биол. факультетов и уча-щихся спец. старших классов гимназий. — М.: МЦНМО, 2002. — 248 с.

3. Практикум по молекулярной биологии / А. С. Коничев, И. Л. Цветков, А. П. Попов и др. — М.: КолосС, 2012. — 151 с.: ил.

4. Современные проблемы биохимии. Методы исследований: учеб.пособие / Е. В. Барковский [и др.]; под ред. проф. А. А. Чиркина. — Минск: Выш. шк., 2013. — 491 с.: ил.

5. Цветков И. Л., Коничев А. С. Биохимические и молекулярно-генетические аспекты адаптации гидробионтов. М.: Из-во МГОУ, 2013. — 122 с.

6. И. Л. Цветков, А. С. Коничев. Экологическая биохимия гидробионтов. М.: Изд-во МГОУ, 2006. 104 с.

7. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the heat of bacteriophage T4. // Nature, V. 227. P. 680—685.

8. Steck, T. L.; Koziarz, J. J.; Singh, M. K.; Reddy, G.; Kohler, H. Preparation and analysis of seven major, topographically defined fragments of band 3, the predominant transmembrane polypeptide of human erythrocyte membranes. Biochemistry, 1978, 17, 1216—1222.